Термолабильная щелочная фосфатаза грамотрицательной бактерии Vibrio splendidus

Термолабильная щелочная фосфатаза — рекомбинантный фермент. Выделена из штамма E.coli, содержащего плазмиду с клонированным геном щелочной фосфатазы грамотрицательной бактерии Vibrio splendidus.

Фермент имеет молекулярную массу ~58 кДа и проявляет каталитическую активность в гомодимерной форме. Температурный диапазон работы фермента — от 15 до 37 °С. Для пролонгированных реакций рекомендуется использовать 15 °C. Термолабильная щелочная фосфатаза удаляет фосфаты с 5`- и 3`-концов ДНК, РНК и может использоваться вместо антарктической фосфатазы.

Фермент находится в растворе для хранения и поставляется с реакционным буфером.

Состав буфера для хранения: 25 мМ Трис (pH 8.0 при 25 °C), 2 мМ MgCl2, 0,02 мМ ZnCl2, 50% глицерин.
Состав 10-кратного реакционного буфера: 10 mM Tris-HCl (pH 9.0 при 25 °C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT.

Одна единица активности соответствует количеству фермента, необходимому для гидролиза 1 μмоля пара-нитрофенилфосфата (PNPP) в 0,5 мл реакционной смеси за 15 мин при 25 °C в стандартном реакционном буфере (10 mM Tris-HCl (pH 9.0 при 25 °C); 10 mM MgCl2; 100 mM NaCl; 1 mM DTT, 10 мМ PNPP).